可見分光光度計(jì)是一種用于測量溶液中吸收和透射的光強(qiáng)度的儀器。其工作原理基于比爾-朗伯定律，該定律指出物質(zhì)在特定波長的光線下吸光度與其在樣品中的濃度成比例。光路由一系列部件組成。Light源通常采用白熾燈或鎢絲燈。這些來源發(fā)出了大量連續(xù)譜光，并經(jīng)過凹面反射鏡聚焦到單一聚焦點(diǎn)上。該點(diǎn)發(fā)出的光然后通過進(jìn)入光柵去除非參考光波長。光量可調(diào)節(jié)使它達(dá)到所需強(qiáng)度。
 

　　目標(biāo)溶液在試管或玻璃杯中放置在一個(gè)透光桶中。(調(diào)制)視樣本容積而改變著的尺寸通常為1厘米，在通道是0.2毫米時(shí)也可能小于這個(gè)數(shù)量外。這對于獲得準(zhǔn)確而有用的結(jié)果至關(guān)重要。操作者需要校準(zhǔn)設(shè)備以確保利用長度。樣品通過后，由光檢測器接收透射光信號。并將光強(qiáng)度轉(zhuǎn)化成電流或電壓輸出。由不同波長的樣本所吸收的可見光譜區(qū)間提供建立的系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)以及衡量其種類。這只是設(shè)備在計(jì)算，突出顯示或輸出分析結(jié)果時(shí)刻發(fā)揮作用的操作步驟。
 

　　和極多數(shù)的實(shí)驗(yàn)室儀器一樣，在硬件部分的工作基礎(chǔ)上還需要軟件來解決數(shù)據(jù)解讀、優(yōu)化和管理問題。分光光度計(jì)通常具有專門的應(yīng)用程序，使得研究人員能夠輕松地準(zhǔn)確識別溶液中的特定物質(zhì)，然后加以定量或用于額外分析。廣泛應(yīng)用于環(huán)境監(jiān)測、食品安全、醫(yī)藥研發(fā)等領(lǐng)域。它可以用來測定物質(zhì)吸收或透射不同波長可見光時(shí)的相對強(qiáng)度，從而得出樣品中某種化合物的存在濃度。正確選擇和使用可見分光光度計(jì)能夠提高工作效率和檢測準(zhǔn)確度。
 

　　可見分光光度計(jì)的選型經(jīng)驗(yàn)介紹：
 

　　測量范圍：通常具有所謂的線性動態(tài)范圍，即在該范圍內(nèi)測量結(jié)果與樣品濃度成正比。如果需要測量較高或較低濃度，則要選擇相應(yīng)比較大或小的線性動態(tài)范圍的儀器，以避免結(jié)果失真。
 

　　分辨率：影響結(jié)果準(zhǔn)確度的一個(gè)因素是分辨率，也就是儀器所能區(qū)分的兩個(gè)信號之間的差異。分辨率越高，理論上結(jié)果越準(zhǔn)確。一般要根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇一款分辨率合適的儀器。
 

　　波長范圍：可見分光光度計(jì)能夠測量的波長范圍通常在300~800nm之間，不同儀器的覆蓋范圍有所不同。選擇時(shí)要確認(rèn)需要測量的化合物的吸收峰是否在可見光波段內(nèi)，否則需要考慮其他類型的分析儀器。
 

　　自動化程度：配備了自動清洗和校準(zhǔn)功能，可以提高實(shí)驗(yàn)效率和結(jié)果的準(zhǔn)確度。如果實(shí)驗(yàn)室需要同時(shí)處理大量樣品，這些功能會非常有用。
 

　　軟件支持：部分提供專業(yè)的軟件支持，包括自動數(shù)據(jù)記錄、曲線擬合和統(tǒng)計(jì)分析等功能。如果實(shí)驗(yàn)需要生成復(fù)雜的報(bào)告或進(jìn)行后續(xù)分析，選擇擁有適當(dāng)軟件支持的儀器是很重要的。